使用約3.5立方公尺之鷄糞于發(fā)酵槽中制作堆肥，并持續(xù)記錄堆肥分別為30、50及70公分深之溫度變化。
于堆肥50公分處深測得發(fā)酵最高溫度約66℃，并進行采樣。將樣品分別保存于4℃冷藏柜與凍存于-70℃冷凍柜中。
將冷藏之堆肥樣品溶于滅菌水后，再分別涂抹于胰蛋白胨大豆洋菜培養(yǎng)基與含5%脫脂奶粉之胨蛋白大豆洋菜培養(yǎng)基上，
在50℃培養(yǎng)下胰蛋白胨大豆洋菜培養(yǎng)基上能長出眾多不同之菌落，并可在含5%脫脂奶粉之胨蛋白大豆洋菜培養(yǎng)基挑選到產生胞外蛋白酶之菌株共八株
。由16S rDNA序列分析得知，此八株菌除一株為產堿桿菌屬外，其他皆為桿菌屬。當這些分離株與商業(yè)化或專利菌株比較其蛋白酶活性時，有些分離株的活性比較高。
因此，有些分離株具有進一步研究的潛力