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常用的光學(xué)儀器-
熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)和應(yīng)用
由于沒(méi)有最優(yōu)化光學(xué)及有效的檢測(cè)器,傳統(tǒng)的熒光
顯微鏡是一個(gè)非常緊密的光路安
排((light budget)。為了使一部分光子到達(dá)眼睛或膠片,這些顯微鏡需要使盡可能多的光
子通過(guò)顯微鏡。由于只使用一種熒光染料,因此可以用一個(gè)短通激發(fā)光濾光器以使得所
有比某一靶波長(zhǎng)短的波長(zhǎng)的光都能通過(guò)。這一波長(zhǎng)通常是最大激發(fā)光波長(zhǎng)和最大發(fā)射光
波長(zhǎng)的中間波長(zhǎng)。將一個(gè)二色光束分裂器以45度角放置,以便將水銀弧燈的短波長(zhǎng)光
反射至物鏡,物鏡再將光聚集到標(biāo)本。發(fā)射出的熒光通過(guò)物鏡收集,由于是長(zhǎng)波長(zhǎng)的光
故能穿過(guò)光束分裂器,再通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)通發(fā)射光濾光器到達(dá)檢測(cè)器,常常是觀察者的眼
睛。二色光束分裂器原則上能單獨(dú)使用,然而實(shí)際上卻不行,因?yàn)閺纳w玻片反射來(lái)的激
發(fā)光并不是完全由光束分裂器反射。激發(fā)和發(fā)射光濾光器可供多數(shù)波長(zhǎng)選擇;光束分裂
器則將光反射至標(biāo)本或透射到檢測(cè)器。多探針實(shí)驗(yàn)時(shí),需要用一個(gè)更狹
細(xì)的帶通濾光器代替短通激發(fā)濾光器;同時(shí)以帶通發(fā)射濾光器代替長(zhǎng)通發(fā)射濾光器。
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